Efectos biológicos de la medicación en la enfermedad de Chagas / Biological effects of the medication in the Chagas disease

Se estudió el mecanismo de acción de dos tripanocidas de uso clínico, el nifurtimox [nitrofurano] y el benznidazol [nitroimidazol] y de otros nitrofuranos análogos con sustituyentes nitroheterocíclicos aromáticos del 5-nitro-2-furfurilideneamino [NF]. Estos últimos son tripanocidas experimentales. Los resultados obtenidos demuestran que: a) Los nitrofuranos, a concentraciones del orden de las halladas en la sangre de los pacientes chagásicos tratados con nifurtimox inhiben [a] las enzimas microsomales citocromo P-450 dependientes anilina-4-hidroxilasa y aminopirina-N-demetilasa y [2] la glutatión reductasa citosólica y mitocondrial. Con las enzimas microsomales, las mayores inhibiciones se encontraron con los derivados del NF-triazol y NF-imidazol. El nifurtimox fue menos activo como inhibidor de la aminopirina-N-demetilasa y de la anilina-4-hidroxilasa. El benznidazol inhibió la citocromo P-450 mono-oxigenasa, pero menos que el nifurtimox. El análisis de la inhibición de la anilina-4-hidroxilasa por el NF-benzimidazol excluyó las cinéticas de tipo competitiva, acompetitiva y no competitiva. La inhibición de la mono-oxigenasa se produjo en microsomas suplementados con NADPH como dador de electrones, pero con hidroperóxido de cumeno como sustrato, en cuyo mecanismo no está involucrada la NADPH-citocromo P-450 reductasa, las inhibiciones fueron pequeñas o nulas. Estos resultados indican que la inhibición de la P-450 mono-oxigenasa se debió principalmente al desvío de electrones con destino a la formación del radical nitroanión y en aerobiosis, del anión superóxido. La inhibición de la glutatión reductasa citosólica o mitocondrial en hígado, corazón y riñón mostró una cinética acompetitiva respecto al sustrato glutatión oxidado y a la coenzima NADPH y no determinó un ciclo redox del grupo nitro. El benznidazol no inhibió a la enzima... (TRUNCADO)(AU)

Efectos biológicos de la medicación en la enfermedad de Chagas / Biological effects of the medication in the Chagas disease

Se estudió el mecanismo de acción de dos tripanocidas de uso clínico, el nifurtimox [nitrofurano] y el benznidazol [nitroimidazol] y de otros nitrofuranos análogos con sustituyentes nitroheterocíclicos aromáticos del 5-nitro-2-furfurilideneamino [NF]. Estos últimos son tripanocidas experimentales. Los resultados obtenidos demuestran que: a) Los nitrofuranos, a concentraciones del orden de las halladas en la sangre de los pacientes chagásicos tratados con nifurtimox inhiben [a] las enzimas microsomales citocromo P-450 dependientes anilina-4-hidroxilasa y aminopirina-N-demetilasa y [2] la glutatión reductasa citosólica y mitocondrial. Con las enzimas microsomales, las mayores inhibiciones se encontraron con los derivados del NF-triazol y NF-imidazol. El nifurtimox fue menos activo como inhibidor de la aminopirina-N-demetilasa y de la anilina-4-hidroxilasa. El benznidazol inhibió la citocromo P-450 mono-oxigenasa, pero menos que el nifurtimox. El análisis de la inhibición de la anilina-4-hidroxilasa por el NF-benzimidazol excluyó las cinéticas de tipo competitiva, acompetitiva y no competitiva. La inhibición de la mono-oxigenasa se produjo en microsomas suplementados con NADPH como dador de electrones, pero con hidroperóxido de cumeno como sustrato, en cuyo mecanismo no está involucrada la NADPH-citocromo P-450 reductasa, las inhibiciones fueron pequeñas o nulas. Estos resultados indican que la inhibición de la P-450 mono-oxigenasa se debió principalmente al desvío de electrones con destino a la formación del radical nitroanión y en aerobiosis, del anión superóxido. La inhibición de la glutatión reductasa citosólica o mitocondrial en hígado, corazón y riñón mostró una cinética acompetitiva respecto al sustrato glutatión oxidado y a la coenzima NADPH y no determinó un ciclo redox del grupo nitro. El benznidazol no inhibió a la enzima... (TRUNCADO)

Diabetes y transporte de calcio en mitocondrias hepaticas / Diabetes and calcium transportation in liver mitochondria

Se aislaron las mitocondrias hepáticas de ratas normales y ratas con diabetes crónica por inyección de estreptozotocina. Se determinó su capacidad de captar Ca2+ en un medio isotónico, con succinato como fuente de energía y Antipirilazo III como indicador de [Ca2+]. Se comprobó que la velocidad de captación fue significativamente menor en las mitocondrias diabéticas. La inhibivión con Ruthenium Red permitió medir la velocidad de eflujo del Ca2+, que resultó significativamente mayor que en las mitocondrias normales. La medida del potencial de membrana con safranina como indicador dio un valor significativamente menor en las mitocondrias diabéticas, en concordancia con la disminución de la captación de Ca2+ (AU)

Diabetes y transporte de calcio en mitocondrias hepaticas / Diabetes and calcium transportation in liver mitochondria

Se aislaron las mitocondrias hepáticas de ratas normales y ratas con diabetes crónica por inyección de estreptozotocina. Se determinó su capacidad de captar Ca2+ en un medio isotónico, con succinato como fuente de energía y Antipirilazo III como indicador de [Ca2+]. Se comprobó que la velocidad de captación fue significativamente menor en las mitocondrias diabéticas. La inhibivión con Ruthenium Red permitió medir la velocidad de eflujo del Ca2+, que resultó significativamente mayor que en las mitocondrias normales. La medida del potencial de membrana con safranina como indicador dio un valor significativamente menor en las mitocondrias diabéticas, en concordancia con la disminución de la captación de Ca2+

Inhibición de la glutation reductasa por nifurtimox y otros derivados del 5-nitrofurano / Glutathione reductase inhibition by nifurtimox and related nitrofurans

Derivados del 5-nitrofurano portadores de heterociclos nitrogenados insaturados inhibieron la GR de hígado, corazón y riñoz de rata, con mayor eficiencia que portadores de hetereciclos saturados o de grupos de estructura acíclica , como el nifurtimox, la nitrofurazona y el ácido 5 nitro-2-furoico. La inhibición muestra cinética acompetitiva respecto a los sustratos NADPH y GSSG y no implica un ciclo redox del grupo nitro o diversión de electrones al oxígeno, con formación de oxi-radicales. Ell 2-nitroimidazol y su derivado el benznidazolm el 5-nitroindol y el cloranfenicol (derivado del nitrobencilo), no inhibieron la GR. La GP, enzima asociada fisiológicamente a la GR para la desintoxicación de hidroperóxidos no fue inhibida por los nitrofuranos activos sobre la GR, cuando la disponibilidad de GSH fue suficiente para la actividad de la GP. Cuando la actividad de la GR fue limitante de la concentración de GSH, la actividad GP del sistema fue inhibida

Inhibición de la glutation reductasa por nifurtimox y otros derivados del 5-nitrofurano / Glutathione reductase inhibition by nifurtimox and related nitrofurans

Derivados del 5-nitrofurano portadores de heterociclos nitrogenados insaturados inhibieron la GR de hígado, corazón y riñoz de rata, con mayor eficiencia que portadores de hetereciclos saturados o de grupos de estructura acíclica , como el nifurtimox, la nitrofurazona y el ácido 5 nitro-2-furoico. La inhibición muestra cinética acompetitiva respecto a los sustratos NADPH y GSSG y no implica un ciclo redox del grupo nitro o diversión de electrones al oxígeno, con formación de oxi-radicales. Ell 2-nitroimidazol y su derivado el benznidazolm el 5-nitroindol y el cloranfenicol (derivado del nitrobencilo), no inhibieron la GR. La GP, enzima asociada fisiológicamente a la GR para la desintoxicación de hidroperóxidos no fue inhibida por los nitrofuranos activos sobre la GR, cuando la disponibilidad de GSH fue suficiente para la actividad de la GP. Cuando la actividad de la GR fue limitante de la concentración de GSH, la actividad GP del sistema fue inhibida (AU)

Inhibición de la lipoperaxidación en microsomas de hígado por nifurtimox y nitrofurantoina / Inhibition of lipoperoxidation in liver microsomes by nifurtimox and nitrofurantoin

El nifurtimox y la nitrofurantoína, dos nitrofuranos, inhibieron la formación de malondialdehído (MDA) por microsomas de hígado de rata incubados durante una hora con un sistema generador de NADPH (NADP+, glucosa-6-P, glucosa-6-P deshidrogenasa y Cl2 Mg), ADP y Fe**3+. Las drogas ensayadas se disolvieron en dimetilformamida previo a su agregado al medio de incubación. El efecto del nifurtimox se manifestó en función del tiempo de incubación, de la concentración de droga y disminuyó significativamente cuando se omitió la adición de ADP-Fe**3+. Al tiempo de inhibir la formación de MDA, el nifurtimox inhibió la destrucción de los ácidos grasos polietilénicos microsomales. Este efecto se expresó por las variaciones de la relación araquidónico/oleico, docosahexanoico/oleico y el índice de dobles ligaduras. El nifurtimox inhibió también la destrucción del citocromo P-450, correlacionada con la lipoperoxidación. El solvente utilizado como vehículo del nifurtimox fue crítico para la inhibición, pues con DMSO el nifurtimox estimuló la formación de MDA, no así con DMFA, el solvente que se utilizó en los experimentos descriptos. Con los sistemas peroxidantes ascorbato-Fe e hidroperóxido de t-butilo-Fe, que inducen la lipoperoxidación sin involucrar la NADPH-citocromo P-450 reductasa, el efecto inhibidor del nifurtimox fue relativamente menor comparado con la inhibición observada con el sistema NADPH-Fe. En esa forma, los resultados con ascorbato-Fe y peróxido de t-butilo-Fe indican inhibición de la iniciación de la lipoperoxidación. Sin embargo, cuando se agregó NADPH en concentración catalítica, la inhibición de la lipoperoxidación inducida por el hidroperóxido de t-butilo-Fe aumentó significativamente, sugiriendo la... (AU)

Inhibición de la lipoperaxidación en microsomas de hígado por nifurtimox y nitrofurantoina / Inhibition of lipoperoxidation in liver microsomes by nifurtimox and nitrofurantoin

El nifurtimox y la nitrofurantoína, dos nitrofuranos, inhibieron la formación de malondialdehído (MDA) por microsomas de hígado de rata incubados durante una hora con un sistema generador de NADPH (NADP+, glucosa-6-P, glucosa-6-P deshidrogenasa y Cl2 Mg), ADP y Fe**3+. Las drogas ensayadas se disolvieron en dimetilformamida previo a su agregado al medio de incubación. El efecto del nifurtimox se manifestó en función del tiempo de incubación, de la concentración de droga y disminuyó significativamente cuando se omitió la adición de ADP-Fe**3+. Al tiempo de inhibir la formación de MDA, el nifurtimox inhibió la destrucción de los ácidos grasos polietilénicos microsomales. Este efecto se expresó por las variaciones de la relación araquidónico/oleico, docosahexanoico/oleico y el índice de dobles ligaduras. El nifurtimox inhibió también la destrucción del citocromo P-450, correlacionada con la lipoperoxidación. El solvente utilizado como vehículo del nifurtimox fue crítico para la inhibición, pues con DMSO el nifurtimox estimuló la formación de MDA, no así con DMFA, el solvente que se utilizó en los experimentos descriptos. Con los sistemas peroxidantes ascorbato-Fe e hidroperóxido de t-butilo-Fe, que inducen la lipoperoxidación sin involucrar la NADPH-citocromo P-450 reductasa, el efecto inhibidor del nifurtimox fue relativamente menor comparado con la inhibición observada con el sistema NADPH-Fe. En esa forma, los resultados con ascorbato-Fe y peróxido de t-butilo-Fe indican inhibición de la iniciación de la lipoperoxidación. Sin embargo, cuando se agregó NADPH en concentración catalítica, la inhibición de la lipoperoxidación inducida por el hidroperóxido de t-butilo-Fe aumentó significativamente, sugiriendo la...

Menor oxidación de cuerpos cetónicos por mitocondrias de corazón en la diabetes / Decreased oxidation of ketone bodies in heart mitochondrias in diabetes

Ratas diabéticas por inyección de estreptozotocina presentaron concentraciones de 3-hidroxibutirato y acetoacetato en sangre 4,2 y 1,7 veces superiores a las normales, respectivamente. Al mismo tiempo, en las mitocondrias de corazón disminuyó la actividad de las enzimas iniciadoras del metabolismo oxidativo de esos cuerpos cetónicos, a saber, la 3-hidroxibutirato deshidrogenasa (72%) y la succinil-CoA: acetoacetil-CoA (3 - oxoácido - CoA) transferasa (50%). En cambio, la acetoacetil-CoA tiolasa, no varió. La oxidación del 3-hidroxibutirato y el acetoacetato por las mitocondrias enteras de ratas diabéticas, suplementadas con ADP (en estado metabólico "3") disminuyó 42 y 48%, respectivamente, en relación a los testigos normales, no así la oxidación del piruvato o del L-glutamato más L-malato que no varió significativamente. Estas observaciones implican una modificación selectiva de las enzimas correspondientes a los cuerpos cetónicos. La composición lipídica y la depolarización de la fluorescencia del difenil hexatrieno en las mitocondrias diabéticas no presentaron diferencias respecto a las normales, de manera que las variaciones enzimáticas descriptas se pueden atribuir a una síntesis defectuosa de las proteínas mitocondriales

Menor oxidación de cuerpos cetónicos por mitocondrias de corazón en la diabetes / Decreased oxidation of ketone bodies in heart mitochondrias in diabetes

Ratas diabéticas por inyección de estreptozotocina presentaron concentraciones de 3-hidroxibutirato y acetoacetato en sangre 4,2 y 1,7 veces superiores a las normales, respectivamente. Al mismo tiempo, en las mitocondrias de corazón disminuyó la actividad de las enzimas iniciadoras del metabolismo oxidativo de esos cuerpos cetónicos, a saber, la 3-hidroxibutirato deshidrogenasa (72%) y la succinil-CoA: acetoacetil-CoA (3 - oxoácido - CoA) transferasa (50%). En cambio, la acetoacetil-CoA tiolasa, no varió. La oxidación del 3-hidroxibutirato y el acetoacetato por las mitocondrias enteras de ratas diabéticas, suplementadas con ADP (en estado metabólico "3") disminuyó 42 y 48%, respectivamente, en relación a los testigos normales, no así la oxidación del piruvato o del L-glutamato más L-malato que no varió significativamente. Estas observaciones implican una modificación selectiva de las enzimas correspondientes a los cuerpos cetónicos. La composición lipídica y la depolarización de la fluorescencia del difenil hexatrieno en las mitocondrias diabéticas no presentaron diferencias respecto a las normales, de manera que las variaciones enzimáticas descriptas se pueden atribuir a una síntesis defectuosa de las proteínas mitocondriales (AU)